Fluorescence Ploarization (FP)

 

형광편광(FP)은 시약에서의 결합 반응을 모니터링하는 데 널리 사용되는 기법입니다. 단백질간 결합, DNA Hybridization, Enzyme 활성 등의 Biomolecule의 결합/상호작용에 적용할 수 있는 기술로, 기초 과학 분야부터 High-Throughput Screening까지 다양하게 접목됩니다.

평면 편광으로 Excitation되며 형광 표지된 작은 분자(추적자)는 추적자가 Excitation과 Emission 사이의 시간 동안 빠른 속도로 떨어지기 때문에 대부분 탈편광을 방출합니다. 하지만 추적자가 훨씬 더 큰 분자에 결합하면 훨씬 느린 속도로 회전하여 방출된 광선이 대부분 편광 상태를 유지합니다.

 

형광 편광 G 인자

 

밀리 P, 즉 mP 단위로 표시되는 편광은 편광 Excitation Light(아래 공식 참조)의 방향과 관련되어 검출된 직각(Iperp) 및 평행(Ipara) 형광의 세기 값의 측정 수치에서 계산됩니다. G 인자(G)는 편광 값에 영향을 줄 수 있는 필터, 편광자 및 단색기와 같은 광학 구성품의 영향을 수정하는 데 사용됩니다.

 

다른 결합 assay 대비 FP의 장점

 

FP는 수용기-리간드 상호작용, 단백질-DNA 상호작용, 단백질 가수분해, 막 유동성, 효소 assay 등을 연구하는 목적으로 사용할 수 있습니다. FP assay는 Kinase, Phosphatase, 프로테아제, GPCR(G protein-coupled receptor) 및 핵 수용기 등 매우 다양한 표적을 성공적으로 조사하는 데 사용되어 왔습니다.

다음과 같은 이점 때문에 FP assay는 특히 high-throughput screening이 가능합니다.

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